创新科技
专注于等温核酸扩增技术研发及应用
禽流感病毒H5N1的重组酶介导检测方法学研究-陈淑丹
采用逆转录 - 重组酶介导核酸扩增技术（Reverse Transcription Recombinase- aided amplification, RT-RAA）建立检测禽流感病毒 H5N1 的快速方法。根据禽流感病毒 H5N1 保守序列设计引物及探针，将 H5N1 RNA 逆转录为 cDNA，然后以 cDNA 作模板，扩增检测病毒核酸序列。本研究构建了带有 H5N1 核酸序列的质粒，以此为模板检测不同浓度的质粒，分析该方法的灵敏度，对已知样本进行检测来验证方法的特异性。设计的 H5N1 特异性引物和探针，能在 39℃恒温下，10 ～ 30 min 可有效扩增出相应病毒的核酸，与其他流感病毒无交叉反应；对质粒的检测灵敏度可达 10 拷贝。建立的 RT-RAA 检测禽流感病毒 H5N1 方法灵敏度和特异性均较高，且该方法操作简单，适用于禽流感病毒 H5N1 的快速检测。
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