创新科技

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专注于等温核酸扩增技术研发及应用

不对称重组酶介导扩增结合分子信标检测金黄色葡萄球菌方法的建立与应用-第三军医大

目的,建立一种基于重组酶介导扩增技术(RAA)与分子信标相结合的病原菌恒温快速检测方法。方法方法学的建立。通过金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)所对应的基因设计相应引物及分子信标探针,不断调整引物浓度比例以确定最佳引物浓度比来进行不对称护增,利用不对称重组酶介导扩增并与分子信标探针杂交,通过琼脂糖凝胶电泳及荧光采集观测结果。将阳性质粒以 10 倍的梯度稀释,检测该方法的灵敏度。利用该 RAA杂交法检测大坪医院检验科微生物室保存的 2016年12月的72株包含金黄色葡萄球菌及葡萄球菌属其他种细菌的菌株,以检测该方法的特异性。在特异性实验基础上添加我室保存的 2016年12月的39 例其他菌株进行 Kappa 一致性检验及临床诊断效能评价。

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