创新科技

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专注于等温核酸扩增技术研发及应用

非洲猪瘟病毒实时荧光RAA检测方法的建立-南京农大&动卫

为了建立非洲猪瘟病毒(ASFV)简捷 、高效的基层临床检测方法,本研究选取非洲猪瘟病毒保守基因B646L(P72)序列,设计特异性引物和探针,建立非洲猪瘟病毒实时荧光重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法。结果显示,所建立方法与 OIE 推荐的荧光定量 PCR 方法灵敏度相当,低至 10 copies/μL,检测时长仅需 10 min,与口蹄疫病毒(FMDV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒 2 型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)均无交叉反应。对 100 份临床样品的检测结果与 OIE 推荐的荧光定量 PCR 结果一致,但相较于荧光定量 PCR 检测时间的2h,检测时间大大缩短。结果表明,本研究建立的方法灵敏度较高、特异性较好,为 ASFV 早期临床诊断提供了技术支持。

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