创新科技
专注于等温核酸扩增技术研发及应用
塔希纳病毒的重组酶介导扩增快速检测方法-CDC&云南寄生虫防治所
摘要: 目的 采用反转录重组酶介导核酸扩增(RT-RAA)方法建立塔希纳病毒(TAHV)检测方法。方法 在TAHVS节段保守区设计引物和探针。用构建含检测目的基因片段的质粒和病毒细胞培养物对 TAHV的 RT-RAA 检测方法的灵敏性进行评价,通过检测黄病毒属、甲病毒属,正布尼亚病毒属和东南亚十二节段病毒属共7种病毒验证方法的特异性。并选用 2018 年采集自宁夏回族自治区的 30 批次蚊虫样本来评价该检测方法。结果该方法对构建的质粒标准品的检测下线为 100 拷贝/反应病毒培养物最低检出限为 10空斑形成单位反应,与其他7种虫媒病毒无交叉反应。在检测蚊虫样本时,该方法与实时定量PCR 方法检测结果的一致性为 100%。结论 建立了快速、特异以及灵敏的 TAHV的 RT-RAA 检测方法,并适用于标本中TAHV 核酸的现场检测。
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