
创新科技
专注于等温核酸扩增技术研发及应用
基于RAA荧光法快速检测呼吸道腺病毒的研究-杭国旅&杭州疾控&台州海关
摘要:目的 利用重组酶介导核酸扩增技术(RAA)建立快速检测呼吸道腺病毒的方法。方法 根据 NCBI 基因库中呼吸道腺病毒 hexon 基因保守序列设计引物及探针,建立 RAA 检测方法。构建携帶腺病毒 hexon 基因片段的重组质粒梯度稀释,评价 RAA 方法的灵敏性:用建立的 RAA方法检测人偏肺病毒、人博卡病毒,呼吸道合胞病毒、人鼻病毒甲型流感病毒、乙型流感病毒,验证方法的特异性。结果 用不同接贝数hexon基因片段的重组质粒进行RAA扩增,在 20min 内即可得到扩增结果,最低扩增拷贝数为 10拷贝/;与人偏肺病毒、人博卡病毒,呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、甲型流感病毒,乙型流感病毒无交叉反应。结论 建立的RAA方法灵敏度和特异性高,反应快速,操作简单,适用于呼吸道腺病毒的快速检测。
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