
创新科技
专注于等温核酸扩增技术研发及应用
甲型流感病毒的逆转录重组酶介导核酸扩增快速检测方法研究-浙江国旅&浙江检验检疫
摘要:目的 利用逆转录重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)建立检测甲型流感病毒的快速方法。方法通过使用逆转录酶,将甲流病毒 RNA 逆转录为 cDNA,根据 NCBI基因库中甲型流感病毒保守序列设计引物及探针,用 cDNA 作模板,进行 RT-RAA 检测甲型流感病毒:构建携带甲型流感病毒的质粒,检測已知样本,分析该方法的灵敏度和特异性。结果 采用甲型流感病毒通用型引物和探针,能有效扩增出相应病毒的核酸,而对其他非甲流病毒无交叉反应:RT-RAA反应过程均在 39℃恒温条件下完成,用时30mi 即可得到扩增结果,反应体系中最低扩增拷贝数为 100 copies。结论 建立的 RT-RAA 检测甲型流感病毒方法灵敏度和特异性高,反应快速,操作简单,适用于甲型流感病毒通用型的快速检测。
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