创新科技
专注于等温核酸扩增技术研发及应用
重组酶介导恒温扩增快速检测人鼻病毒的方法学研究_陈淑丹
摘要:目的采用反转录重组介导核酸扩增技术(reverse transciptase recombinase aided amplifcation,RT-RAA)建立检测人鼻病毒的快速方法。方法根据 NCB基因库中人鼻病毒保守序列设计引物及探针,将人鼻病毒 RNA 反转录为eDNA,然后使用反转录声,以 eDNA 作模板,扩增检测人鼻病毒核酸序列。研究采用构建带有人鼻病毒核酸序列的历粒,检测不同浓度的质粒分析该方法的灵敏度,采用已知样本检测方法的特异性。结果 设计的人鼻病毒特异性引物和探针,能有效扩增出相应病毒的核酸,而与其他病毒无交叉反应。该反应条件为 39 ℃恒温,扩增结果用时 30 min,最低扩增拷贝数为 100拷贝。结论 建立的 ㎡-RAA 检测人鼻病毒方法灵敏度和特异性高,反应快速、操作简单,适用于人鼻病毒的快速检测。
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